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    血培养采集操作规程

     

    发布时间: 2012年06月21日     作者:检验医学中心 姜楠  编辑:lsw    点击次数:30603

    1.概述
        当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌菌血症。血液和骨髓的细菌学培养对菌血症的诊断具有重要价值。临床菌血症按病程可分为一过性菌血症、间歇性菌血症、持续性菌血症。菌血症患者多数为间歇性菌血症,病原菌周期性出现在血液中,随之为无细菌时期。不管临床症状经历的严重程度,患者血液中病原菌浓度相当低,据此要求临床多次采集血液标本进行培养,但24h内一般不超过3次。血培养常见菌:革兰阴性菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠杆菌,伤寒沙门菌、绿脓假单胞菌、不动杆菌属等;革兰阳性菌主要包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、念珠菌属等。菌血症是临床医学急症,应尽快采集血液进行培养。

    2.物品准备与检验申请
    2.1.领取专用血培养瓶。请拿检验申请单到二楼检验科领取。检验科周一到周日正常上班。
    2.2.检验申请单与标本一起送检。

    3.采集指征
        一般患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征:发热(≥38℃) 或低温(≤36℃) ,寒战,白细胞增多(计数大于10. 0×109/ L ,特别有“核左移”时) ,皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血压降低,C 反应蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前,及时做血培养。

    4.采集方法
    4.1操作流程: 打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即送检。(全自动血培养系统的专用培养瓶注入血液后不需再消毒瓶塞,也不用再盖塑料盖,直接送检)
    4.2 严格执行规范的皮肤消毒法,推荐用三步法:(1)用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上(2)用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上,涂擦穿刺皮肤2遍,待干燥。(3)75%酒精脱碘:用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒液 ,待酒精挥发干燥后采血。
    4.3 采血量
    成人采血量是8~10 ml ,儿童1~3 ml 。
    4.4  操作注意事项:
    (1)从静脉采血,不建议从动脉采血,在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,但不可接触穿刺点。
    (2)用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次穿刺,应换针头) 直接注入消毒后的血培养瓶。
    (3)血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检,切勿冷藏!
    (4)多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。除非无法作静脉穿刺取血,否则不应从留置导管内取血。
    (5)如血培养是通过静脉植入管采集的,不用弃去起始部分的血液,应同时自外周静脉采集血液进行血培养,以协助判读血培养阳性结果。
    (6)抽血前应将标签贴于血培养瓶颈上,标签内容包括病人基本信息、采血时间、采血部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上,否则仪器无法识别。
    4.5 血培养次数和采血时间
        采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在患者发热期间越早越好,以发热高峰前1h内或病人寒战和发热开始时采集为宜。在30-60分钟内或同时于不同部位采集2~3 份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养) ;除非怀疑有感染性心内膜炎或其他静脉内感染如导管相关性感染时,才可分开时段采集。24h内采血一般不超过3次。在采取血培养后的2-5天内,不需要再重复采取血培养,因为进行治疗后的2-5天血液中的感染细菌不会马上消失。
        特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议: (1) 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎、肾盂肾炎发热患者,应在不同部位(如两臂)采集2~3 份血标本(应在抗生素治疗前完成)。(2)不明原因发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热,第1天内相隔1h在不同部位连续采集2~3 份血标本,当培养24~48h后若为阴性,应再采集2-3份血培养。(3)可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,以获得罕见的或苛养的微生物。(4)可疑细菌性心内膜炎:急性病例,在抗生素治疗或改变前1~2h内从不同部位采集3份血标本;亚急性病例,第1天24h内相隔1h连续采集3次血标本,若24~48h全部阴性,再采集2~3次血标本;若已经抗生素治疗患者,连续3天,每天取2次血标本。
        婴幼儿血培养采集要求:(1)采血量不能超过全血量的1%。(2)一般只抽一瓶需氧瓶进行培养,无需常规做厌氧瓶。

    5 .标本运送和验收
    5.1 采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温保存,切勿冷藏。
    5.2 血培养瓶验收: (1) 检查培养瓶是否有渗漏、破裂或明显污染。(2)检查瓶子上的标签与申请单是否相符。(3)检查血液标本是否适量,血液是否凝固。
    5.3 不合格血培养标本的处理: (1)拒收培养瓶:血培养瓶标识与化验申请单不符,培养瓶破裂或明显污染,血液凝固的培养瓶。处理方法:立即与临床医师联系,报告拒收的具体理由。(2)补做培养瓶:血标本采集后放置12h以上(手工法除外),用不适当类型的培养瓶收集标本,用过期的培养瓶收集标本,采血量不足等。处理方法:立即与临床医师联系,报告标本不合格的具体理由,建议补做血培养。

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