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    脑脊液细胞染色法

     

    发布时间: 2011年05月05日       编辑:梁斯文    点击次数:15840

    迈-格-姬(MGG)染色法原理:
    瑞氏和姬氏染料中均含有碱性的美蓝和酸性伊红。 蛋白质-氨基酸(含COOH、NH2)为两性物质;核染色质的核酸与强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白(强碱性)与伊红反应呈红色;同时核蛋白中含少量弱酸性蛋白及氨基酸,可与美蓝反应呈,但量少而不显蓝色,故细胞核多染成紫红色;有学者认为:瑞氏对胞浆着色好,姬氏对胞核着色好,两者合并可兼其优,且标本存放时间较长,故脑脊液细胞学检查多采用MGG染色法。
    试剂配制:
    染色液:瑞氏染料粉1克,姬氏染料粉0.5克,甘油30ML,加纯甲醇600ML溶解过滤后即成。
    缓冲液:PH6.4-6.8最佳。
    染色步骤:
    500r/min,3-5min离心后,等玻片上沉淀物自然干透后——染色液数滴至标本完全盖住——染色2分钟后——加缓冲液:染色液(约1:2)——染色8分钟——蒸馏水冲洗数秒——待干镜检
    染色不佳原因及纠正方法:

    不佳表现

    原因

    纠正方法

    1、染色过浅

    时间过短;染液过少;缓冲液过多;染液或缓冲液偏酸

    重染

    2、染色过深

    与上述原因相反,另夏季甲醇挥发过快。

    甲醇脱色后重染

    3、染色偏碱(常见)

    与2原因相似,此外玻片偏碱或冲洗时偏短也会。

    如染液过碱,可加1%醋酸少许纠正。或将标本浸入95%乙醇中数秒后再冲洗。

    4、染色偏酸(少见)

    染液过久或与空气接触,甲醇氧化成甲酸,玻片或缓冲液偏酸

    新旧染液混用或加1%碳酸氢钠适量。

    5、染料沉渣过多

    染料与缓冲液混合不均;冲洗前已将染料、缓冲液倾去;染料用前未过滤;甲醇挥发过快。

    加甲醇溶解沉淀颗粒后再重染。

    6、染片过脏

    滑石粉污染,标本瓶清洗不彻底等

    避免滑石粉污染CSF,洗净标本瓶

     

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