脑脊液细胞染色法

发布时间： 2011年05月05日编辑：梁斯文点击次数：15838

迈-格-姬（MGG）染色法原理：
瑞氏和姬氏染料中均含有碱性的美蓝和酸性伊红。蛋白质-氨基酸（含COOH、NH2）为两性物质；核染色质的核酸与强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白（强碱性）与伊红反应呈红色；同时核蛋白中含少量弱酸性蛋白及氨基酸，可与美蓝反应呈，但量少而不显蓝色，故细胞核多染成紫红色；有学者认为：瑞氏对胞浆着色好，姬氏对胞核着色好，两者合并可兼其优，且标本存放时间较长，故脑脊液细胞学检查多采用MGG染色法。
试剂配制：
染色液：瑞氏染料粉1克，姬氏染料粉0.5克，甘油30ML，加纯甲醇600ML溶解过滤后即成。
缓冲液：PH6.4-6.8最佳。
染色步骤：
500r/min,3-5min离心后，等玻片上沉淀物自然干透后——染色液数滴至标本完全盖住——染色2分钟后——加缓冲液：染色液（约1：2）——染色8分钟——蒸馏水冲洗数秒——待干镜检
染色不佳原因及纠正方法：

不佳表现	原因	纠正方法
1、染色过浅	时间过短；染液过少；缓冲液过多；染液或缓冲液偏酸	重染
2、染色过深	与上述原因相反，另夏季甲醇挥发过快。	甲醇脱色后重染
3、染色偏碱（常见）	与2原因相似，此外玻片偏碱或冲洗时偏短也会。	如染液过碱，可加1%醋酸少许纠正。或将标本浸入95%乙醇中数秒后再冲洗。
4、染色偏酸（少见）	染液过久或与空气接触，甲醇氧化成甲酸，玻片或缓冲液偏酸	新旧染液混用或加1%碳酸氢钠适量。
5、染料沉渣过多	染料与缓冲液混合不均；冲洗前已将染料、缓冲液倾去；染料用前未过滤；甲醇挥发过快。	加甲醇溶解沉淀颗粒后再重染。
6、染片过脏	滑石粉污染，标本瓶清洗不彻底等	避免滑石粉污染CSF，洗净标本瓶